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更新時間:2026-06-10
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單細胞光控誘導新方案,替代傳統他莫昔芬
背景簡介:
Cre?ERT2、Gal4?ERT2 化學誘導系統是基因編輯與發育生物學經典工具,常規依靠他莫昔芬全域加藥誘導蛋白入核、啟動基因重組,但固有短板難以規避:
1藥液全域擴散,無法實現單細胞、局部組織定點誘導,難以區分局部與整體細胞表型;
2.他莫昔芬穩定性差、極易滲漏,陰性對照組常出現非特異性提前激活,實驗本底偏高;
3.藥物一次性起效,誘導時間無法人為精準把控,不利于捕捉胚胎瞬時發育、細胞動態變化。
法國 Idylle-labs 聯合法國國家科研中心 CNRS Ludovic Jullien 課題組,依托《ChemBioChem》原始研究成果,自研Actiflash 籠合型光控小分子試劑,將傳統全皿化學誘導升級為紫外 / 雙光子定點光控誘導;避光條件下試劑無生物活性,僅在指定波長光照后定點產生活性配體,現已成為 ERT2 時空精準調控領域優選試劑。
產品作用原理:
Actiflash 為籠合環芬衍生物(Caged Cyclofen-OH,他莫昔芬同骨架衍生物),作用邏輯清晰:
1.避光靜置階段:分子呈籠狀封閉結構,無游離活性配體,無法結合 ERT2 靶點,零自發本底激活,常溫避光孵育可自由穿透細胞膜;
2.光照脫籠階段:325~425 nm 長波紫外、750 nm 雙光子 / 1064 nm 三光子紅外激光定點照射,斷裂籠合保護基團,瞬時釋放活性 Cyclofen?OH;
3.蛋白入核起效:活性配體結合 ERT2 結構域,促使 Cre、Gal4、激酶、轉錄因子等融合蛋白脫離胞質抑制蛋白并入核,啟動基因重組、靶基因轉錄或靶蛋白激活。
產品優勢:
1.單細胞級時空精準誘導:依托激光局部定點激發,僅激活單個細胞或小塊胚胎組織,輕松構建嵌合突變體,解決傳統全板同步給藥的局限性;
2.超低本底、陰性結果干凈:避光孵育全程無活性物質泄露,對比他莫昔芬無提前激活問題,實驗重復性更佳;
3.活性產物理化穩定:光照生成的 Cyclofen?OH 抗光降解,適配長時間活細胞連續成像,誘導效果穩定持久;
4.激發波段細胞毒性低:選用長波紫外與紅外多光子激發,規避短波紫外帶來的細胞、胚胎光損傷,適配斑馬魚胚胎、原代細胞活體實驗;
5.操作簡便,細胞滲透性優異:小分子直接添加至培養液即可使用,細胞常規工作濃度 3-5 uM,無需額外助溶劑與轉染處理。
產品應用:
1.Cre?LoxP 系統定點基因敲除 / 敲入,實現局部組織特異性基因編輯;
2.Gal4?UAS 體系單細胞瞬時過表達,探究瞬時基因表達引發的細胞表型改變;
3.原位定點激活凋亡、抑癌蛋白,動態觀測細胞增殖與凋亡變化;
4.斑馬魚胚胎細胞譜系示蹤,解析器官發育、細胞遷移機制;
5.體外抗腫瘤藥理、靶蛋白瞬時調控相關機理探究。
產品信息:
貨號 | 產品名稱 | 英文名稱 | 規格 |
LJU-CIN-5 | 光誘導型蛋白激活劑 | Actiflash | 5mg/50mg |
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